胡杨谷胱甘肽过氧化物酶PeGPX基因的克隆及转化植株耐  

王菲菲 , 丁明全 , 邓澍荣 , 王美娟 , 孙健 , 侯佩臣 , 马旭君 , 张玉红 , 赵楠 , 沈昕 , 陈少良
北京林业大学生物科学与技术学院, 北京, 100083; 2浙江农林大学农业与食品安全学院, 杭州, 311300; 3北京农业信息技术研究中心, 北京, 100097
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2012 年, 第 31卷, 第 37 篇   
收稿日期: 2012年04月09日    接受日期: 2012年10月31日
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摘 要

胡杨(Populus euphratica Oliv.)具有极强抗盐碱能力。本实验室前期胡杨微阵列芯片数据结果显示:盐胁迫下,胡杨谷胱甘肽过氧化物酶基因(PeGPX)的转录上调,暗示该基因可能对胡杨耐盐性具有一定的作用。为分析GPX对植物耐盐性的贡献,本研究以胡杨为材料,利用RT-PCR方法克隆了胡杨谷胱甘肽过氧化物酶PeGPX基因,并在烟草中过量表达该基因,以分析谷胱甘肽过氧化物酶活性与植物耐盐性的关系。研究结果显示,实验中克隆的cDNA (PeGPX)编码谷胱甘肽过氧化物酶,其ORF为693 bp,其蛋白由231个氨基酸编码。过量表达PeGPX 基因的烟草与野生型烟草的耐盐性实验结果显示,野生型烟草植株在加NaCl (200 mM/L)的MS培养基中生长15 d后,无明显的长高,且不长根;而转基因烟草在同样的加盐培养基上,生长基本没有受到抑制,植株生长状态良好,并且能够长根。光合数据显示,在盐胁迫下过量表达PeGPX基因烟草的净光合速率受到影响明显小于野生型烟草的净光合速率。酶活数据显示,转基因株系GPX酶活与野生型的相比在盐胁迫下活性有非常显著的提高。我们的研究结果说明:过表达PeGPX基因使得烟草的耐盐性得到显著提高,这对深入研究PeGPX基因在胡杨耐盐机制中的作用具有重要的意义。

关键词
胡杨;谷胱甘肽过氧化物酶;转基因烟草;抗盐性
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基因组学与应用生物学
• 第 31 卷
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