重组嵌合抗人CD22 四价基因工程抗体在昆虫杆状病毒中的表达  

马玲 , 邵帅 , 潘汉世 , 陈凤莲 , 黄红 , 石胜 , 吴健敏
广西兽医研究所, 广西畜禽疫苗新技术重点实验室, 南宁, 530001
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2013 年, 第 32卷, 第 63 篇   
收稿日期: 2013年03月21日    接受日期: 2013年04月11日
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摘 要

重组嵌合抗人CD22 四价基因工程抗体是由一条短肽链将两个鼠源抗CD22 mAb 的scFv 连接起来,再与人IgG1 的CH3 片段连接所获得重组基因工程抗体(cRFB4-CH3),是目前开发治疗B 细胞系淋巴瘤的人源化基因工程抗体。为探讨该重组基因工程抗体高效表达技术,本研究利用DNA 重组技术将含有人IgG1 的CH3 段的抗人CD22 四价基因工程抗体基因克隆到含信号肽的重组杆状病毒载体pAcSG2 中,构建重组质粒pAcSG2-cRFB4-CH3 并转染到Sf9 细胞中,构建携带有重组嵌合抗人CD22 四价基因工程抗体基因的重组杆状病毒AcNPV-cRFB4-CH3。通过对该重组毒进行PCR 和IFA 鉴定,证实获得了可以稳定表达抗人CD22 四价基因工程抗体的重组杆状病毒。以蚀斑试验进一步纯化病毒,经过3 次病毒蚀斑克隆,获得毒价达到4.5伊107 pfu/mL 重组病毒,为治疗白血病药物的开发和应用打下了基础。

关键词
CD22;人源化;基因工程抗体;杆状病毒;表达
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基因组学与应用生物学
• 第 32 卷
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