马铃薯StTOM1和StTOM3双干扰植物双元表达载体的构建及转化验证  

宋静静1 , 蒙姣荣1,2 , 卢晓静3 , 邹承武3 , 陈保善2,3
1 广西大学农学院, 南宁, 530004; 2 广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530004; 3 广西大学生命科学与技术学院,南宁, 530004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 23 篇   
收稿日期: 2013年11月11日    接受日期: 2013年12月24日
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摘 要

根据马铃薯StTOM1StTOM3的cDNA序列,用PCR分别扩增长度为272bp和182bp的两段干扰片段,以内含子StGA20为间隔分别从正反两个方向同时连接到中间载体pUCCRNAi上,获得pUStT1-StT3-dRi(±)质粒。经测序验证后,再将含有内含子的双基因干扰片段StT1-StT3从pUStT1-StT3-dRi(±)切下,连接到双元载体pBI121上,获得pBIStT1-StT3-dRi (±)质粒。用农杆菌介导方法,将StT1-StT3片段转入马铃薯中。荧光定量PCR结果显示,pBIStT1-StT3-dRi (±)转入后,转基因马铃薯中StTOM1 基因mRNA的表达水平与阴性对照相比平均下调了78%,StTOM3 基因下调了81%。说明pBIStT1-StT3-dRi (±)载体可有效抑制StTOM1StTOM3基因mRNA的表达。

关键词
马铃薯; StTOM1; StTOM3; 植物双元表达载体
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基因组学与应用生物学
• 第 33 卷
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