云小乐¹ , 董仕超¹ , 张威¹ , 谢基明² , 康鸿斌³ , 王玉珍¹

1 内蒙古农业大学生命科学学院, 呼和浩特, 010018; 2 内蒙古自治区医院检验科, 呼和浩特, 010010; 3 内蒙古医学院附属医院普外科, 呼和浩特, 010051
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基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 48 篇   
收稿日期: 2014年01月02日    接受日期: 2014年02月25日

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本实验主要是从人乳腺癌细胞中克隆Rab7 基因并进行基因序列比对和分析。通过培养乳腺癌细胞MCF-7 和MDA-MB231，提取细胞总RNA，逆转录为cDNA，以此cDNA 为模板，根据GenBank 公布的人Rab7 全长序列设计引物，扩增Rab7 基因的开放阅读框。将其与真核表达载体pc-DNA3.1 连接，构建pcDNARab7重组质粒。测序后发现MCF-7 细胞中克隆的Rab7 序列与GenBank 序列的同源性为91%，发生了多处突变，其中94.4%为同义突变，5.5%为错义突变。但是MDA-MB231 细胞中克隆的Rab7 基因序列与GenBank中的Rab7 序列的同源性为100%。由于发现Rab7 在MCF-7 乳腺癌细胞中发生突变，而在MDA-MB-231乳腺癌细胞中基因未发生突变，我们推测Rab7 基因的突变是否与乳腺癌的产生有关系，这个发现为以后研究Rab7 与乳腺癌的关系奠定了基础。

Rab7； 基因克隆； 基因突变； MCF-7；MDA-MB231