离子束重组酵母菌Ar_Han0458的RAPD与SSH的初步研究  

毛培宏1 , 吕杰1,2
1新疆大学物理科学与技术学院离子束生物技术研究中心, 乌鲁木齐, 830046; 2新疆大学资源与环境科学学院分子生态学研究室, 乌鲁木齐, 830046
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 70 篇   
收稿日期: 2015年01月01日    接受日期: 2015年01月30日
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摘 要

通过低能氩离子束注入介导蓝麻黄基因组DNA在异常汉逊酵母菌中随机转化,获得了遗传稳定的生物合成麻黄碱的重组酵母菌株Ar_Han0458。RAPD分子检测结果表明重组菌株和出发菌株基因组之间存在多态性变化,从重组菌株DNA中分离得到一个439 bp的差异条带。经PCR验证,其5’端150 bp片段来源于麻黄基因组。通过SSH实验,从重组菌株DNA中分离获得9条差异基因表达片段,BLAST同源比对分析,其中5条差异表达基因片段功能分别为:乙醇脱氢酶、二氢鞘氨醇羟化酶、分子伴侣蛋白、亚精铵转运蛋白和NAD依赖的差向异构酶/脱水酶,另外4条差异表达基因在数据库中无同源序列。

关键词
低能氩离子注入;重组酵母菌;RAPD;SSH;序列分析
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基因组学与应用生物学
• 第 34 卷
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