宿玲恰^1,2 , 张悦^1,2 , 吴敬^1,2

1江南大学食品科学与技术国家重点实验室, 无锡, 214122; 2江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室, 无锡, 214122
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基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 226 篇   
收稿日期: 2015年06月01日    接受日期: 2015年06月30日

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海藻糖具有独特的生物活性，在多种行业应用广泛。海藻糖合酶能够专一性催化麦芽糖一步生成海藻糖。本文通过PCR扩增获得了来源于Thermus thermophilus ATCC33923的海藻糖合酶基因TreS，构建了基因工程菌E. coli BL21(DE3)/pET-24a(+)-TreS。工程菌在摇瓶中发酵28 h时，胞内海藻糖合酶酶活达到最高值为6.4 U×mL^-1。进一步研究了该重组酶制备海藻糖的影响因素，发现当以10%麦芽糖为底物，初始反应pH 7.5，加酶量为15 U×g^-1麦芽糖，40°C，150 r×min^-1反应24 h，转化率达到最高值，为49.0%。当底物浓度提高至20%-40%时，转化率为45.4-46.2%。

嗜热栖热菌；海藻糖合酶；海藻糖；克隆表达