适于基因组测序的高纯度的大豆线粒体基因组DNA提取方法  

李玉秋1,2 , 张春宝1 , 赵洪锟1 , 谭化1 , 费晓燕1 , 赵丽梅1 , 董英山1
1吉林省农业科学院大豆研究所, 长春, 130033; 2中国科学院东北地理与农业生态研究所, 长春, 130102
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 268 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日
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摘 要

为满足高通量二代测序要求,本研究采用大豆黄花苗为试材,结合差速离心、蔗糖密度梯度离心及超速离心方法提取高纯度大豆线粒体基因组DNA(mtDNA)。结果表明,差速离心能够有效去除核基因组掺杂;超速离心与蔗糖密度梯度离心结合能够有效去除叶绿体污染。提取的mtDNA经琼脂糖凝胶电泳、紫外光度计检测及叶绿体和细胞核特异性引物检测表明,该方法提取的大豆mtDNA无叶绿体DNA及核DNA污染,且纯度高,可满足测序等对线粒体高纯度的要求,为研究大豆线粒体相关性状的机理奠定了坚实基础。

关键词
大豆;mtDNA;差速离心;超速离心;线粒体
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基因组学与应用生物学
• 第 34 卷
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