尼罗罗非鱼CD80基因的分子克隆与mRNA表达分析  

汪志文1,2,3 , 张海艳1,2,3 , 黄瑜1,2,3 , 鲁义善1,2,3 , 简纪常1,2,3 , 汤菊芬1,2,3
1广东海洋大学水产学院, 湛江, 524088; 2 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室, 湛江, 524088; 3东省水产经济动物病害控制重点实验室, 湛江, 524088
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2017 年, 第 36卷, 第 9 篇   
收稿日期: 2016年08月17日    接受日期: 2016年09月16日
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摘 要

CD80是T细胞活化和增殖过程中不可缺少的膜抗原,为T细胞的增殖分化提供必要的共刺激信号,在特异性细胞免疫过程中具有重要作用。本研究从罗非鱼脾脏组织中克隆获得CD80基因的编码区序列(GenBank登录号: KU884324; 命名为On-CD80),该基因全长810 bp,可编码269个氨基酸,理论分子量为 29.83 kD,等电点为5.97。氨基酸序列分析显示On-CD80具有两个保守的免疫球蛋白样结构域(Ig-like domain),5’端有一个典型的信号肽序列,3’端具有一个跨膜结构域。系统进化树中罗非鱼与伯氏朴丽鱼CD80蛋白聚为一支,显示了较高的同源性。荧光定量PCR分析显示,On-CD80在健康尼罗罗非鱼组织中均有表达,且在脾脏组织中表达量最高。经灭活的无乳链球菌免疫后,On-CD80在肾脏、脾脏、胸腺、肠道、鳃、脑组织中的表达量均显著上调,且表现出较为明显的时间依赖性表达模式,肠道、鳃和脑分别在8 h、24 h出现表达高峰,并于48 h、96 h再次出现表达高峰。脾脏和肾脏、胸腺的On-CD80表达则分别是在48 h、72 h达到表达高峰。综上所述,On-CD80表达能被无乳链球菌所诱导,提示该分子可能参与罗非鱼的抗菌免疫应答,该结果为进一步研究On-CD80在罗非鱼感染无乳链球菌过程中的作用奠定了一定的基础。

关键词
尼罗罗非鱼;CD80;无乳链球菌;mRNA表达分析
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基因组学与应用生物学
• 第 36 卷
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