刘珺 , 廖剑绚 , 唐洪波 , 周芝芳

南华大学附属第一医院耳鼻喉科, 衡阳, 421001
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 210 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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为了观察金黄色葡萄球菌肠毒素B (SEB)对诱导人鼻黏膜上皮细胞分泌粘蛋白MUC5AC的影响，并初步探讨其作用机制，本研究首先在体外培养人鼻黏膜上皮细胞株HNEpC，用不同浓度的SEB孵育细胞0~24 h，ELISA检测培养上清中MUC5AC和转化生长因子-α (TGF-α)的含量；实时定量PCR检测MUC5AC mRNA表达水平；Western blot分析表皮生长因子受体(EGFR)的磷酸化。同时采用肿瘤坏死因子转化酶(TACE) siRNA干扰其表达，观察其对TGF-α分泌的影响，最后采用TGF-α中和抗体、EGFR抑制剂AG-1478或TACE抑制剂TAPI处理细胞，观察其在介导MUC5AC分泌中的作用。结果显示，1 ng/mL、10 ng/mL和100 ng/mL SEB作用鼻黏膜上皮细胞24 h后，可明显诱导其分泌MUC5AC并表达其mRNA，且其分泌水平随着SEB浓度的增高或时间的延长而逐渐增多。SEB也能诱导鼻黏膜上皮细胞分泌TGF-α，并磷酸化EGFR。给予10 μmol/L TACE抑制剂TAPI处理细胞后，TGF-α和MUC5AC分泌水平显著减少，采用TACE siRNA干扰其表达后，TGF-α和MUC5AC也得到了类似结果。采用TGF-α中和抗体预孵育细胞30 min后，可明显抑制EGFR磷酸化。此外，TGF-α和EGFR中和抗体以及AG-1478预处理也可降低MUC5AC分泌。以上结果表明SEB经TACE/TGF-α/EGFR诱导人鼻黏膜上皮细胞表达MUC5AC。

金黄色葡萄球菌肠毒素B；表皮生长因子受体；肿瘤坏死因子α转化酶；转化生长因子-α；粘蛋白5AC