黄鳝(Monopterus albus) P450(11β)基因cDNA的克隆和表达分析  

荣萍
上海海洋大学, 水产与生命学院, 上海, 201306
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2017 年, 第 36卷, 第 36 篇   
收稿日期: 2016年08月09日    接受日期: 2016年09月14日
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摘 要

11β-羟化酶(11β-hydroxylase)由P450 (11β) (Cytochrome P450 11β-hydroxylase)基因编码,是一种重要的线粒体酶,指导合成11-羟睾酮,11-羟睾酮是合成硬骨鱼中最重要的雄性激素11-KT的前体物质,参与精子发生过程。本研究首先利用RT-PCR和RACE技术克隆了黄鳝(Monopterus albus) P450 (11β)基因cDNA全长序列,然后利用生物信息学进行了分析,最后利用RT-PCR和荧光定量PCR方法对不同组织的表达情况进行了研究。结果显示:黄鳝P450 (11β)基因cDNA全长为1 812 bp,开放阅读框1 632 bp共编码544个氨基酸氨基酸,5'非编码区(5' UTR) 9个碱基,3'非编码区(3' UTR) 168个碱基。黄鳝P450 (11β)基因结构的保守性较高,具有细胞色素P450超家族基因的五个特征区域。氨基酸序列同源性分析表明黄鳝与其他鱼类的同源性在64%~76%之间,与舌齿鲈同源性最高为77%,但与人和老鼠的相似度仅为41.9%和37.7%。系统进化树分析以哺乳类为外群,黄鳝与点带石斑鱼、罗非鱼、舌齿鲈等聚为一大支。基因表达显示黄鳝P450 (11β)基因在性腺和脑组织中表达,尤其在精巢中高表达,在卵巢中几乎检测不到。表明该基因对精子发生和精巢发育过程起着一定的作用。

关键词
黄鳝;P450 (11β);克隆;表达分析
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基因组学与应用生物学
• 第 36 卷
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