李清 , 李标 , 郭顺星

中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所, 北京, 100193
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2018 年, 第 37卷, 第 55 篇   
收稿日期: 2017年02月21日    接受日期: 2017年02月27日    发表日期: 2018年02月25日

焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶（pyrophospomevalonate decarboxylase, MVD）是甲羟戊酸途径中的关键酶，在植物细胞萜类物质合成代谢过程中发挥着重要的作用。石斛碱作为倍半萜类生物碱，其合成很可能离不开MVD的参与。本研究利用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（RACE）技术，首次从金钗石斛中克隆到一个MVD基因，命名为DnMVD （GenBank注册号KY626328）。DnMVD基因cDNA全长1763 bp，编码一条由424个氨基酸组成的多肽，分子量为47.13263 kD，等电点6.84。DnMVD编码的蛋白包含GHMP激酶超家族的特异性识别序列，且拥有严格保守的1个亮氨酸、1个天冬氨酸和3个半胱氨酸活性位点，与多种植物MVD高度同源。DnMVD的表达受到菌根真菌的影响，金钗石斛茎中DnMVD的表达量于接菌后期显著高于对照。DnMVD基因的分子鉴定及其在接菌前后金钗石斛茎中的表达特性为进一步解析该基因在金钗石斛萜类物质合成代谢途径及菌根互作过程中的分子调控作用奠定了重要的基础。

金钗石斛；焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶；基因克隆；实时荧光定量 PCR