农杆菌介导热激转录因子8基因转化大豆  

唐晓飞 , 刘丽君 , 高明杰 , 杨喆 , 蒲国峰 , 张雷 , 魏崃
1.黑龙江省农业科学院大豆研究所, 哈尔滨, 150086
2.东北农业大学, 哈尔滨, 150030
黑龙江省农业科学院大豆研究所, 哈尔滨, 150086
黑龙江省农业科学院大豆研究所, 哈尔滨, 150086
黑龙江省农业科学院大豆研究所, 哈尔滨, 150086
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黑龙江省农业科学院大豆研究所, 哈尔滨, 150086
东北农业大学, 哈尔滨, 150030
作者    通讯作者
豆科基因组学与遗传学, 2010 年, 第 1卷, 第 5 篇   doi: 10.5376/lgg.cn.2010.01.0005
收稿日期: 2010年07月23日    接受日期: 2010年10月25日    发表日期: 2010年12月17日
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推荐引用:

Tang et al., 2009, Agrobacterium-Mediated Transformation of hsf8 into Soybean, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 7(3): 444-450 (DOI: 10.3969/mpb.007.000444) (唐晓飞等, 2009, 农杆菌介导热激转录因子8基因转化大豆, 分子植物育种, 7(3): 444-450 (DOI: 10.3969/mpb.007.000444))

摘 要

环境胁迫严重影响作物的生长和发育,热激转录因子(heat shock factor 8, HSF)是一类在热应激反应中起重要作用的蛋白质,主要功能是在热休克基因的表达过程中与相应热激元件结合,启动基因的转录过程,最终促进热休克蛋白(HSP)基因的表达。本文将热激转录因子8 (hsf8)基因构建在植物表达载体pCAMBIA3300中,以大豆子叶节作为受体,通过农杆菌介导法将hsf8基因导入品质性状优良的两个高产大豆新品系哈交5337和哈交5489 中,最后获得转基因植株。在开展大豆遗传转化过程中,探讨了农杆菌介导大豆子叶节转化体系的影响因素,优化了转化条件。在共培养后,采用延迟筛选的方法来提高选择效率。并确定草胺磷筛选浓度为3.5 mg/L。获得转化质粒pCAMBIA3300-HSF8的转基因植株,其中T1代PCR阳性植株17株。采用Real-time PCR的方法对T1代抗性植株进行hsf8基因的转录水平的相对定量分析,确定9株较非转基因植株哈交5337表达量明显提高。有1株明显低于哈交5489的hsf8基因表达量。

关键词
大豆;农杆菌转化;热激转录因子8基因;耐热性
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00035
豆科基因组学与遗传学
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