梁照东^1,2 , 钟昊^1,2 , 周燕² , 李有志¹

1广西大学生命科学与技术学院, 南宁, 530005;
2海南省热带农业资源研究所, 三亚, 572025
作者    通讯作者
昆虫分子生物学研究, 2012 年, 第 1卷, 第 2 篇   doi: 10.5376/imbr.cn.2012.01.0002
收稿日期: 2012年04月26日    接受日期: 2012年07月26日    发表日期: 2012年08月02日

本文首次以英文发表在 Bt Research (2011年第2卷第1期第1-9页)上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用 Creative Commons Attribution License 协议对其进行授权，用中文再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。如果读者对中文含义理解有歧义，请以英文原文为准。

推荐引用：

引用格式(中文)：
梁照东等, 2012, 对鳞翅目昆虫小菜蛾高毒力的苏云金芽孢杆菌的鉴定, 昆虫分子生物学研究(online) Vol.1 No.2 pp.8-15 (doi: 10.5376/imbr.cn.2012.01.0002)
引用格式(英文)：
Liang et al., 2012, Identification of Bacillus thuringiensis Isolates Highly Toxic to Plutella xylostella, Kunchong Fenzi Shengwuxue Yanjiu (online) Vol.1 No.2 pp.8-15 (doi: 10.5376/imbr.cn.2012.01.0002)

本研究利用从黑龙江凉水国家自然保护区的土壤中分离出来的31株Bt野生菌株作为研究菌株，对重要的鳞翅目农业害虫小菜蛾进行高毒力菌株的筛选。经生物活性定性测定，筛选出对小菜蛾活性较高的10株Bt菌株。镜鉴观察表明，这些野生菌株在芽孢形成期均产生对鳞翅目小菜蛾有毒性的菱形晶体伴孢蛋白。cry基因型鉴定表明，这10株菌株均含有cry1类基因。进一步SDS-PAGE分析表明，这10株菌株表达约130 kD的蛋白。对菌株的生长曲线进行分析，发现2~14 h时Bt菌株处于对数生长期，16~30 h时Bt菌株处于稳定期，32 h时Bt菌株进入衰亡期。其中，菌株S2685-1和S2737-3产生大约130 kD的晶体蛋白起始时间分别为培养22小时及20小时，前者到培养26 h时蛋白表达量基本稳定，后者其表达量随时间而逐步增加，到22 h时蛋白的表达量趋于稳定状态。对小菜蛾的半致死浓度(LC50)和半致死时间(LT50)测定显示，S2685-1对小菜蛾的LC50为17.113 ng/mL，LT50为37.343 h；S2737-3对小菜蛾的LC50为25.782 ng/mL，LT50为36.825 h。而标准菌株HD-73对小菜蛾的LC50为15.414 ng/mL，LT50为35.917 h。菌株S2685-1和S2737-3具有较突出的半致死浓度以及半致死时间，两者对小菜蛾有很明显的杀虫活性。从本研究的结果我们认为，Bt菌株S2685-1和S2737-3是两株杀虫活性较为突出，具有一定应用潜力的野生Bt菌株，可望作为标准菌株HD-73的替换菌株，用于作为生产防治鳞翅目害虫的Bt生物农药的出发菌株。

苏云金芽孢杆菌；小菜蛾；Bt毒蛋白；生物测定