马氏珠母贝PmCOLVIA6基因的克隆和表达分析 
梁金连 
,
郑哲 ,
黄荣莲 ,
王庆恒 ,
邓岳文 ,
焦钰 ,
杜晓东 
,
郑哲 ,
黄荣莲 ,
王庆恒 ,
邓岳文 ,
焦钰 ,
杜晓东
广东海洋大学水产学院, 湛江, 524025
作者 通讯作者
海洋生物学学报, 2016 年, 第 5卷, 第 2 篇
收稿日期: 2015年12月08日 接受日期: 2016年02月01日 发表日期: 2016年11月20日
作者 通讯作者
海洋生物学学报, 2016 年, 第 5卷, 第 2 篇
收稿日期: 2015年12月08日 接受日期: 2016年02月01日 发表日期: 2016年11月20日
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本文首次发表在 《基因组学与应用生物学》第35卷上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用 Creative Commons Attribution License,协议对其进行授权，再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。
推荐引用：
引用格式(中文)：
杜晓东等, 2016, 马氏珠母贝PmCOLVIA6基因的克隆和表达分析, 基因组学与应用生物学(online) Vol.5 No.35 (doi: 10.5376/jmb.cn. 2016.05.0002)
引用格式(英文)：
Du et al., 2016, Cloning and Expression Analysis of PmCOLVIA6 Gene of Pinctada martensii, Jiyin Zuxue yu Yingyong Shengwuxue (online) (Genomics and Applied Biology) Vol.5 No.35(doi: 10.5376/jmb.cn. 2016.05.0002)
摘 要
collagen VI (COLVI)是胶原蛋白家族的重要成员，广泛分布于动物体细胞外基质，在脊椎动物骨骼形成过程发挥重要作用。为了探究COLVI在马氏珠母贝贝壳形成中的作用，本研究运用聚合酶链式反应(PCR)和cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得了马氏珠母贝PmCOLVIA6基因的全长序列，克隆获得其启动子区域，并对其蛋白结构进行了分析。荧光定量PCR技术检测了该基因在马氏珠母贝各个组织的表达量分布，并利用原位杂交技术检测PmCOLVIA6基因在外套膜的表达定位。结果表明：PmCOLVIA6序列全长为2 100 bp，开放阅读框(ORF)长为1 875 bp，编码624个氨基酸，5'非翻译区(5' UTR)长56 bp，3'非翻译区(3' UTR)长169 bp，于5'调控区克隆得到长为1 826 bp的序列，可能存在4个启动子序列。PmCOLVIA6蛋白含有典型的vWA结构域，但三股螺旋结构缺失。荧光定量分析表明PmCOLVIA6基因在马氏珠母贝的各个组织均有表达，而在珍珠囊和外套膜中央区的表达量显著高于其它组织。原位杂交结果显示PmCOLVIA6的mRNA主要分布于外套膜中央区的外表皮细胞。综上所述，PmCOLVIA6可能参与马氏珠母贝珍珠层的形成。
关键词
马氏珠母贝；COLVI；表达分析；原位杂交
