葛亚英 , 张飞 , 王炜勇 , 沈晓岚 , 刘建新 , 张智

浙江省农科院花卉研究开发中心，杭州，311202
作者    通讯作者
《分子植物育种》网络版, 2011 年, 第 9卷, 第 119 篇   doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0119
收稿日期: 2011年11月04日    接受日期: 2011年11月30日    发表日期: 2011年12月02日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

推荐引用：

引用格式(中文)：
葛亚英等, 2011, 丽穗凤梨ISSR-PCR反应体系的优化和确立, 分子植物育种(online) Vol.9 No.119 pp.1864-1869 (doi: 10.5376/ mpb.cn.2011.09.0119)
引用格式(英文)：
Ge et al., 2011, Optimization and establishment of ISSR-PCR reaction system of Vriesea Bromeliads, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding) Vol.9 No.119 pp.1864-1869 (doi: 10.5376/mpb.cn.2011.09.0119)

为建立适宜丽穗凤梨DNA的ISSR-PCR扩增体系，本文采用单因子试验对影响ISSR-PCR反应的各组分(Taq DNA聚合酶, 模板DNA, 引物, dNTPs和Mg²⁺浓度)进行了优化，确立了适合丽穗凤梨的条带清晰、多态性高、重复性好的最佳 ISSR-PCR 反应体系，即在20 μL PCR反应体系中含有10× PCR Buffer 2.0 μL、25 mmol/L MgCl₂ 1.2 μL、10 mmol/L dNTPs  0.4 μL、5 U/μL Taq 酶 0.25 μL、10μmol/L引物3.0 μL、20 ng/μL模板1.5 μL，并利用两条引物23个丽穗凤梨品种进行了稳定性鉴定，为丽穗凤梨的遗传多样性分析及育种工作提供了新的技术支持。

丽穗凤梨；ISSR；单因素试验；体系优化