研究报告

芦笋ISSR反应体系的建立及优化  

陈河龙1 , 高建明1 , 张世清1 , 习金根2 , 郑金龙2 , 黄兴2 , 易克贤2*
1中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室, 海口, 571101; 2 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所, 海口, 571101
作者    通讯作者
《分子植物育种》官方网站, 2018 年, 第 16 卷, 第 51 篇   
收稿日期: 2017年04月01日    接受日期: 2017年05月27日    发表日期: 2018年01月18日
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摘要

通过正交试验建立芦笋ISSR优化反应体系,并对其反应程序进行优化。实验结果表明,优化的扩增体系:25 µL的反应体系中含150 ng的模板DNA、0.3 µmol/L 引物、15 µL 2× Mastermix;优化的反应程序:94℃预变性5 min; 94℃变性45 s,设定温度退火60 s,72℃延伸 45 s,循环30次;然后 72℃延伸10 min,4℃保存;筛选到了21条引物并确定其最优退火温度。实验结果为芦笋资源遗传多样性评价的研究奠定基础。

关键词
芦笋;ISSR;体系优化

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