研究报告/Research Report

丝瓜ISSR反应体系的优化  

叶新如1,,2,3 , 朱海生1,,2,3 , 温庆放1,,2,3 , 刘建汀1,,2,3 , 王彬1,,2,3 , 陈敏氡1,,2,3 , 张前荣1,,2,3
1福建省农业科学院作物研究所, 福州, 350013;
2福建省农业科学院蔬菜研究中心,福州, 350013;
3福建省蔬菜工程技术研究中心,福州, 350013
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 25 篇   
收稿日期: 2017年06月29日    接受日期: 2017年07月18日    发表日期: 2018年05月22日
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摘 要

以丝瓜基因组DNA为模板,对ISSR反应中主要5个影响因素Mg2+浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度和DNA模板浓度,建立丝瓜ISSR-PCR反应的体系。根据实验确定的最佳反应体系为:25Μl ISSR体系为:50 ng DNA,0.2 mmol/L dNTP ,1U Taq酶,0.4 umol/L的单条引物,2.5 μL 10×Buffer,2.0 mmol/L Mg2+。在此基础上,对12条引物的退火温度进行优化。最终选用60个丝瓜品种进行所确立扩增体系及扩增程序进行验证,检测结果表现为扩增产物条带清晰明亮、亮度高和重复性好,表明本试验所确定的反应体系及反应程序适用于丝瓜的ISSR分子标记。

关键词
丝瓜;体系优化;ISSR
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• 第 16 卷
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