研究报告

紫苏FAD3基因RNA干扰载体的构建及遗传转化  

黄兴琳 , 高天姝 , 陆俊杏 , 白瑞英 , 张涛
重庆师范大学生命科学学院, 重庆市植物环境适应分子生物学重点实验室, 重庆, 401331
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 15 篇   
收稿日期: 2016年03月07日    接受日期: 2016年04月11日    发表日期: 2016年04月11日
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摘 要

本研究利用RNA干扰的方法抑制紫苏ω-3脂肪酸脱氢酶基因FAD3的表达,以期得到低ALA含量的转基因植株。根据紫苏FAD3基因(GenBank登录号为KC990786.1)序列设计含有不同酶切位点的特异性扩增引物,通过扩增获得长度为258 bp的RNA干扰片段,构建以CaMV35S启动子驱动表达的紫苏FAD3基因RNA干扰表达载体pFGC5941M-FAD3I,将该载体转入根癌农杆菌GV2301后,采用农杆菌介导法进行紫苏的遗传转化,经除草剂抗性筛选和PCR检测获得1株阳性转基因植株。利用荧光定量PCR技术对野生型和转基因阳性苗的FAD3基因进行了表达分析,结果显示,阳性植株中FAD3基因的表达受到显著抑制,FAD3基因表达量降低了80%,说明此研究构建的FAD3基因RNA干扰载体对该基因表达沉默是有效的,为FAD3基因在不饱和脂肪酸代谢过程中的功能研究提供了理论依据。

 

关键词
紫苏;FAD3;RNAi;遗传转化
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