研究报告/Research Report

基于TksGlfex DNA聚合酶SSR扩增的棉花DNA一步提取法研究  

边雷 , 王沛政
海南热带海洋学院, 三亚, 572022
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14卷, 第 111 篇   
收稿日期: 2016年11月29日    接受日期: 2016年12月09日    发表日期: 2016年12月09日
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摘 要

DNA提取是SSR-PCR检测的前提,但因棉花中富含多酚、多糖和蛋白质等干扰物质,使得提取棉花DNA较其他植物困难,这也导致棉花分子辅助育种明显滞后。本研究探索出适用于SSR技术的一步快速提取棉花DNA的方法。该方法DNA提取液成份包括0.1 mol/L NaOH、0.7 mmol/L NaCl、20 mmol/L β-巯基乙醇、2% SDS和2% PVP。该方法的具体步骤是:将液氮下研磨成粉状的棉花幼嫩叶片,放入含0.5 mL DNA提取液的离心管中。热裂解后加入盐酸离心,取上清,直接用于SSR-PCR扩增。将该方法提取的DNA片段较大,质量较好,能很好地用于TksGlfex DNA聚合酶的SSR-PCR扩增,扩增电泳条带清晰。此棉花DNA提取操作简单、高效,相比传统的棉花DNA提取而言,显著地节约DNA提取时间。

关键词
棉花;一步DNA提取;SSR-PCR扩增;TksGlfex DNA聚合酶
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• 第 14 卷
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