研究报告Research Report

喜树中ABA转运蛋白基因CaABAT的克隆及生物信息学分析  

王燕燕 , 洪雨晨 , 韩玉乾 , 于放
大连工业大学生物工程学院, 大连, 116034
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 7 篇   
收稿日期: 2017年04月18日    接受日期: 2017年05月08日    发表日期: 2018年01月28日
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摘 要

以喜树叶片提取的总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增喜树中的ABA转运蛋白基因CaABAT全长序列,并克隆到pGMT载体中,序列分析表明,CaABAT基因4 377 bp,编码1 458个氨基酸,等电点为7.82,分子量约为164.8 KD,且该基因与拟南芥中ABA转运蛋白基因AtABCG40氨基酸序列同源性高达73%,并将该序列提交至Genbank (No.KY882555)。该蛋白的二级结构中α-螺旋为49.45%,β-折叠为11.04%,无规则卷曲39.51%,定位细胞的质膜上。且该蛋白基因功能分类体系(Gene ontology)分析显示其具有ATPase依赖的跨膜转运活性,可能参与细胞内如含氮化合物代谢过程。然后分别分段导入至酵母表达载体pDRGAL与植物表达载体pBIGD中,构建重组质粒pDRGAL-CaABAT和pBIGD-CaABAT。最终为探究CaABAT转运ABA功能以及研究其对植物次生代谢调控奠定基础。

关键词
喜树;脱落酸;脱落酸转运蛋白; 重组质粒;生物信息学
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• 第 16 卷
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