刘丹丹 , 邓澍荣 , 张一南 , 张旋 , 孙健 , 王美娟 , 赵瑞 , 荆艳萍 , 沈昕 , 陈少良

北京林业大学生物科学与技术学院, 北京, 100083
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2013 年, 第 32 卷, 第 58 篇   
收稿日期: 2013年03月13日    接受日期: 2013年03月27日

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胡杨(Populus euphratica Oliv.)抗盐碱能力强于其它种类杨树。本实验室前期对胡杨的研究表明：盐胁迫下，胡杨腺苷三磷酸双磷酸水解酶基因(PeAPY)的转录水平上调，预示该基因可能在胡杨应对盐胁迫中发挥作用。本研究利用RT-PCR 方法克隆了胡杨腺苷三磷酸双磷酸水解酶PeAPY2基因，将该基因在烟草BY-2细胞中过表达，分析PeAPY2基因与植物耐盐性的关系。结果证明，PeAPY2编码腺苷三磷酸双磷酸水解酶，其 ORF 区长为 1404 bp，编码467个氨基酸。对转PeAPY2 基因的烟草BY-2细胞及野生型烟草BY-2细胞进行长期盐处理，结果表明，烟草BY-2细胞过表达PeAPY2 基因后提高了耐盐性，但并没有明显改善由甘露醇(200~600 mmol/L)引起的渗透胁迫。盐处理 (50~150 mmol/L, NaCl) 2周后，野生型BY-2细胞鲜重和干重都低于转PeAPY2 基因的烟草细胞。转基因细胞跟野生型细胞相比，Na⁺的上升幅度较小而K⁺的下降幅度也较小。随着盐胁迫时间的延长，转基因细胞膜透性低于野生型细胞，在盐胁迫下细胞活力高于野生型细胞。说明烟草BY-2细胞过表达PeAPY2 基因后改善了其对盐的耐受性，这对深入研究PeAPY2 基因在胡杨耐盐机制中的作用具有重要的意义。

胡杨；腺苷三磷酸双磷酸水解酶； PeAPY2 基因； 转基因烟草细胞；抗盐