贺兵^1,2 , 谢晓燕¹ , 殷红^1,3*

1西北大学生命科学学院, 西安, 710069;
2海南卫康药业有限公司, 安庆, 246300;
3西部资源与现代生物技术省部共建教育部重点实验室, 西安, 710069
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2018 年, 第 37 卷, 第 42 篇   
收稿日期: 2016年12月16日    接受日期: 2017年03月17日    发表日期: 2018年01月25日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

通过研究一株内生梨孢镰孢霉(Fusarium poae)发酵产物中不同极性提取物对兔膝软骨细胞的影响，初步了解其中毒性物质的基本性质，为进一步探讨真菌毒素在大骨节病发病中的可能作用以及分离新的潜在致病物质奠定基础。本研究以预实验中筛选出的对软骨细胞有较强毒损作用的F. poae菌株进行摇瓶培养；发酵产物先用75%乙醇进行提取，再将乙醇总提取物用不同极性的溶剂进行萃取；将所得各种次级提取物分别作用于体外培养的兔膝软骨细胞，选择与大骨节病密切相关的指标来检测它们对软骨细胞造成的损伤程度。其中细胞存活率采用噻唑蓝(MTT)显色法，II型胶原蛋白及蛋白聚糖的含量分别采用免疫组化法和甲苯胺蓝染色法，二者相应的mRNA表达量用半定量RT-PCR进行检测。结果发现，不同极性溶剂提取所得的石油醚、乙醚、乙酸乙酯和水提取物，都能在不同程度上造成培养兔软骨细胞的存活率、II型胶原蛋白和蛋白聚糖的合成以及相应mRNA的表达量降低；毒性强弱有随溶剂极性增强而减弱的趋势，以石油醚分部的综合毒损作用最强，其后依次为乙醚、乙酸乙酯和水提取物。镰孢霉发酵产物的各种不同极性提取物中，都存在对软骨细胞相关指标造成程度不等毒损作用的物质。这些结果支持我们关于大骨节病的发病可能和多种真菌毒素的综合作用相关的观点。

镰孢霉；发酵产物；软骨细胞；大骨节病