薛番艳¹ , 苏辉昭¹ , 刘兴艳¹ , 梁伟¹ , 李磊¹ , 李瑞芳¹ , 陆光涛^1,2

1广西大学生命科学与技术学院, 南宁, 530005;
2亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530005
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2012 年, 第 31卷, 第 51 篇   
收稿日期: 2012年07月02日    接受日期: 2012年08月03日

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十字花科黑腐病菌(Xcc8004)中的一个转录调控因子XC_2736 (hpaR1)在致病过程中具有重要的作用。前期研究发现该转录调控因子可能调控胞外纤维素酶的合成。为了解HpaR1对纤维素酶的转录调控机理，本研究对HpaR1进行原核表达纯化，并与488 bp的包含XC_0639的启动子区DNA片段进行凝胶电泳迁移率试验，发现HpaR1与XC_0639启动子可以发生结合。将488 bp的XC_0639的启动子DNA片段与报告基因gus融合，构建XC_0639的报告质粒pGUS0639r，分别导入野生型8004菌株和缺失突变体DM2736中，分析发现在突变体背景下GUS的表达水平比野生型背景明显降低。表明hpaR1正调控XC_0639的表达。构建XC_0639的极性整合突变体PK0639，检测发现PK0639几乎丧失胞外纤维素酶的活力；通过功能反式互补构建的互补菌株CPK0639可以恢复纤维素酶活性。研究结果表明hpaR1通过调控纤维素酶基因XC_0639的表达来调控细胞的纤维素酶活性。本研究为更深入地了解hpaR1如何调控细菌生理生化功能奠定了基础。

十字花科黑腐病菌；转录调控因子；HpaR1；纤维素酶