王潮岗 , 张雪芹 , 胡章立

深圳大学生命科学学院, 深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室, 深圳, 518060
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2013 年, 第 32卷, 第 28 篇   
收稿日期: 2012年12月01日    接受日期: 2012年12月10日

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本研究以雨生红球藻34-1n为材料，提取其基因组DNA，利用限制性内切酶Sau3AⅠ对基因组DNA进行酶解，回收6-8 kb的基因组DNA片段，并浓缩至200 ng/ μL。该片段与经BamHI 酶切和去磷酸化处理后的pUC18载体连接，然后电击转化到受体菌 Escherichia.coli DH5中，获得雨生红球藻34-1n的基因组文库。该文库的平均插入片段长度约为6.5 kb，获得6×105个克隆数。通过PCR筛选，由雨生红球藻基因组文库中获得含bkt1序列的单克隆菌，与β-胡萝卜素氧化酶序列(GenBank: DQ086233.1)进行比对，结果表明bkt1基因组序列含有6个外显子。本研究为进一步鉴定雨生红球藻相关基因提供了一个文库平台。

雨生红球藻；基因组文库；质粒载体；β-胡萝卜素酮化酶基因