猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的E基因克隆及生物信息学分析  

李斌1,2 , 卢冰霞1,2,3 , 秦毅斌1,2 , 赵武1,2 , 梁家幸1,2 , 韦超文4 , 何颖1,2 , 苏乾莲1,2 , 陈忠伟1,2 , 段群棚1,2 , 李莹莹1,2,3 , 姜佳佳1,2 , 梁保忠1,2 , 黄伟坚3
1 广西兽医研究所,南宁,530001
2 广西畜禽疫苗新技术重点实验室,南宁,530001
3 广西大学动物科学技术学院,南宁,530005
4 广西田林县动物疫病预防控制中心,田林,533300
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2013 年, 第 32卷, 第 73 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日
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摘 要

为了研究开发快速、敏感、特异的猪流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis, JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,我们对2012年分离到的广西猪流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEVFC792株的E基因进行克隆、测序及生物信息学分析。结果测序获得1500bp的完整FC792E基因序列,经同源性比对及遗传进化树分析表明,FC792株为基因Ⅲ型JEV毒株,且属于弱毒株。应用在线软件SignalP 4.1FC792E蛋白进行信号肽的预测,结果预测到FC792E蛋白不存在信号肽。应用在线软件NetNGlyc 1.0预测到FC792E蛋白存在1N-糖基化位点:154-NYSA,线软件NetPhos 2.0预测到其存在如下磷酸化位点:丝氨酸(Ser)有10个位点;苏氨酸(Thr)有6个位点;酪氨酸(Tyr)有5个位点。应用在线免疫信息学软件预测到FC792E蛋白有16B细胞抗原优势表位(分值(score)≥0.85),5CTL抗原表位,10Th抗原表位。应用在线软件GOR4预测FC792E蛋白的二级结构,发现α-螺旋区域占21.20%,延伸链区域占30.40%;无规则卷曲区域占48.40%。应用在线软件SWISS-MODELFC792E蛋白进行三维结构预测的同源模建,结果可见FC792E蛋白存在大量的无规则卷曲和延伸链区域,并有多个α-螺旋区域,它们螺旋扭转卷曲形成近似左右对称的2个亚基的二聚体空间立体结构。这些研究结果为今后研制猪JE诊断抗原和猪JE基因工程疫苗提供参考借鉴。

关键词
分子生物学;生物信息学;预防兽医学
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基因组学与应用生物学
• 第 32 卷
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