唐东阶^1,2 , 钟婉莹² , 秦春铃² , 唐纪良^2,3 , 晁耐霞³

1 亚热带农业生物资源保护利用国家重点实验室, 南宁, 530005
2 广西大学生命科学与技术学院, 南宁, 530005
3 广西医科大学基础医学院, 南宁, 530021
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2013 年, 第 32卷, 第 82 篇   
收稿日期: 2013年07月16日    接受日期: 2013年07月31日

CsrA/RsmA 蛋白家族是细菌中一类重要的转录后全局调控因子，它们调控细菌的碳代谢、次生代谢、运动、生物被膜形成以及致病等过程。CsrA/RsmA 蛋白家族通常由60~72 个氨基酸基组成，其中第1 至第52 位氨基酸高度保守，而第53 位以后的氨基酸则高度可变。目前人们认为其氨基酸高度保守性是不同种属细菌CsrA/RsmA 功能和作用机理相似的基础，但是其高度可变区与不同种属CsrA/RsmA 蛋白功能差异的关系尚不清楚。我们之前的研究显示，大肠杆菌(Escherichia coli)的CsrA (CsrA_{E. coli} )蛋白的高度可变区(第53 至第61 位氨基酸残基)具有强烈的抑制十字花科黒腐病菌(Xanthomonas campestris pathovar campestris, 简称Xcc)胞外蛋白酶活性的能力。本研究中，我们采用丙氨酸置换方法，确定了CsrA_{E. coli} 可变区中抑制Xcc 胞外蛋白酶活性必需的氨基酸残基。结果显示，CsrA_{E. coli} 蛋白的第54 位赖氨酸(K54)、第60 位丝氨酸(S60)和第61 位酪氨酸(Y61)置换成丙氨酸后，CsrA_{E. coli} 蛋白丧失了抑制Xcc胞外蛋白酶活性的能力；而其它位点的丙氨酸置换不影响其抑制Xcc胞外蛋白酶活性的能力。这个结果证明K54、S60 和Y61 是CsrA_{E. coli} 抑制Xcc胞外蛋白酶活性所必需的，为揭示大肠杆菌的CsrA E. coli 蛋白抑制Xcc胞外蛋白酶活性的分子机理奠定基础。

十字花科黒腐病菌； 胞外蛋白酶； 大肠杆菌CsrA； 丙氨酸置换