1 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西大学,南宁, 530004
2 广西大学动物科学技术学院,南宁, 530004
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 7 篇
收稿日期: 2013年09月17日 接受日期: 2013年10月15日
2 广西大学动物科学技术学院,南宁, 530004
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 7 篇
收稿日期: 2013年09月17日 接受日期: 2013年10月15日
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摘 要
viperin是一种由I型和II型干扰素诱导的宿主蛋白,在进化上高度保守。本研究以小鼠脑组织为原材料,通过RT-PCR方法扩增得到完整ORF的1155 bp的viperin基因,成功亚克隆并构建了原核表达载体pET-32a-vip,将其转化到大肠杆菌Rosetta中进行原核表达。结果表明:原核表达的重组蛋白viperin主要以包涵体的形式表达,用镍离子亲和层析法获得纯度较高的viperin蛋白,为探讨原核表达的viperin抗原抗原特性,将纯化的viperin蛋白免疫4周龄昆明小鼠,制备得到抗viperin多克隆抗体。经Western blot 和IFA 检测,证明该抗体的特异性良好和效价高,效价达到1:500,还能与真核细胞自然表达的viperin反应良好,表明原核表达的viperin具有良好的抗原性。获得的多克隆抗体为进一步研究viperin的抗病毒生物学功能奠定了良好的基础。
关键词
viperin; 原核表达; 抗原性; 小鼠
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