重组人Midkine真核表达载体的构建以及蛋白表达和纯化  

徐杨琪1 , 李京敬2 , 关文1 , 郜尽2 , 贾世香3 , 屠平3 , 韩伟2 , 俞雁1
1 上海交通大学农业与生物学院, 上海, 200240; 2 上海交通大学药学院, 上海, 200240; 3 交晨生物医药技术(上海)有限公司, 上海, 200240
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 40 篇   
收稿日期: 2013年12月10日    接受日期: 2014年01月07日
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摘 要

Midkine(MK)是一种肝素结合型生长因子,在胚胎早期的分化发育、肿瘤、炎症、再生等方面发挥着重要的调控作用。本研究将人MK(hMK)全长基因构建到pPICZa(B)表达载体上,通过化学转染方法,转染质粒至不同酵母菌株中进行筛选,利用毕赤酵母的高密度发酵进行表达,纯化出高纯度的重组人Midkine(rhMK),并通过试验证明,纯化的rhMK具有趋化UMR106细胞的活性。rhMK的真核表达与纯化方法的建立为后续的药效学试验奠定了基础,并对其它蛋白的真核表达、纯化也有一定的参考意义。

关键词
中期因子; 毕赤酵母; 发酵; 离子交换层析; 高效液相色谱
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基因组学与应用生物学
• 第 33 卷
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