黄勇^1,2 , 朱向星^1,2 , 全守能^1,2 , 卢晟盛^1,2

1 广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530004; 2 广西大学动物科学技术学院, 南宁, 530004
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基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 45 篇   
收稿日期: 2013年10月15日    接受日期: 2013年11月26日

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本试验旨在优化电转染电压并构建转基因体细胞，为生产转基因广西巴马小型猪打下技术储备。以新生广西巴马小型猪肾脏成纤维细胞和pEGFP-N1为材料、以细胞存活率和转染率为电转染效率评价指标，筛选最佳电压，然后用优化电压进行电转染并经G418抗性筛选获得转基因体细胞系，通过体细胞核移植技术获得转基因克隆胚胎。本研究筛选出最佳电压为120v，用优化电压进行电转染并成功构建表达GFP的阳性细胞，最后通过体细胞核移植成功获得表达GFP的转基因克隆胚胎。结果表明优化的电转染电压可以高效构建广西巴马小型猪转基因体细胞，并可通过体细胞核移植生产转基因克隆胚胎。

电转染； 转基因； 广西巴马小型猪； 克隆