邓彦飞 , 石德顺 , 刘庆友 , 邓海莹 , 罗婵 , 杨素芳

广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530005
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2013 年, 第 32卷, 第 113 篇   
收稿日期: 2013年06月04日    接受日期: 2013年07月11日

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Krüppel样因子4(Klf4)在调控细胞增殖、分化和胚胎发育中有重要作用，也是生产诱导多能干细胞(iPSC)重要的转录因子之一。本研究对水牛Klf4进行克隆和表达研究，为生产水牛iPSC和研究其在体细胞重编程中的机理奠定基础。采用RT-PCR克隆并分析水牛Klf4编码区序列(CDS)；mRNA水平和蛋白水平检测Klf4在水牛胎儿成纤维细胞(BFF)和胃上皮细胞(BSEC)中的表达情况；构建表达水牛Klf4的逆转录病毒载体(pMX-Klf4)，病毒感染BFF，免疫荧光技术分析外源Klf4在BFF中的表达情况。结果表明：水牛CDS全长1434 bp，氨基酸序列与牛、猪、人和鼠相应氨基酸序列的相似性分别为：99%、97%、92%和92%，蛋白结构保守；内源Klf4在BFF和BSEC中都有表达，pMX介导的外源Klf4能在BFF中表达。

水牛；Klf4；编码区序列； 真核表达