范晴 , 谢芝勋 , 谢志勤 , 刘加波 , 庞耀珊 , 邓显文 , 谢丽基 , 罗思思

广西兽医研究所, 广西畜禽疫苗新技术重点实验室, 南宁, 530001
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 47 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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 根据GenBank中已发表的牛病毒性腹泻病毒囊膜糖蛋白E2基因设计1对特异性引物，以Oregon CV24株为模板，PCR扩增目的片断后与pET-32a原核表达载体连接，转化大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞，用IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳分析表达产物，结果表明重组E2蛋白在体外得到较好表达，表达的融合蛋白分子量为57.7ku。可溶性分析表明重组E2蛋白以包涵体的形式存在，经镍柱His标签蛋白纯化后进行western-blot检测。结果表明：E2重组蛋白均具有反应原性，能与BVDV的阳性血清进行反应。

BVDV； E2； 原核表达