张谊¹ , 张明²

1 西昌学院动物科学学院,西昌,615013
2 四川农业大学动物科技学院,雅安,625014
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 115 篇   
收稿日期: 2014年04月08日    接受日期: 2014年05月07日

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通过PCR方法扩增得到牛干扰素-τ（bIFN-τ）基因，克隆到pMD18-T载体中。经BamHⅠ和NdeⅠ双酶切回收后定向克隆到原核表达载体pET-28a(+)中，构建了重组融合表达质粒pET-28a-bIFN-τ，转化大肠杆菌BL21(DE3)，用IPTG诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果表明：bIFN-τ基因的插入方向和读码框在重组融合表达质粒pET-28a-bIFN-τ中均正确；说明在大肠杆菌BL21(DE3)中该基因已实现了融合表达，其表达量占菌体总蛋白的20.68%。对表达条件进行优化后，其表达量可达28.84%。重组蛋白主要以包涵体形式存在，经纯化和鉴定，表明表达产物为bIFN-τ蛋白。

牛；干扰素-τ；融合表达；大肠杆菌