嗜水气单胞菌诱导的中华鳖SMART cDNA文库构建及相关基因的鉴定  

李伟1,3* , 朱阿莉1,2* , 史燕1 , 朱新平1,2,3
1 中国水产科学研究院珠江水产研究所;农业部热带亚热带水产种质资源利用与养殖重点实验室,广州,510380
2 南京农业大学无锡渔业学院,无锡,214081
3 上海海洋大学水产与生命学院,上海,2013063
* 并列第一作者 ** 通讯作者,zhuxinping_1964@163.com
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 125 篇   
收稿日期: 2014年04月01日    接受日期: 2014年05月07日
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摘 要

以致病性嗜水气单胞菌(A eromonas hydrophila)人工感染的中华鳖(Trionyx sinensis)心、肝、脾、肾为材料,应用SMART 技术(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)构建了嗜水气单胞菌感染组织的cDNA 文库。将获得的cDNA 片段连接到PGEM-T 载体,然后电转化进入大肠杆菌DH5琢感受态细胞中,PCR 阳性检测结果显示插入片段在0.5~2 kb之间。该库含有4.3伊105个重组子,重组效率为92%,本实验分析鉴定了164个逸1 000 bp的片段,39 个序列在中华鳖中首次发现,鉴定的基因包括免疫基因11 个;信号转导基因6 个:催化类基因15 个;转运相关基因3 个;结构基因7 个;未知基因9 个。本实验文库的成功构建,不仅鉴定了中华鳖机体与细菌感染相关的免疫基因,同时为深入展开免疫学、系统发育和病原与机体的互作研究奠定了良好基础。

关键词
中华鳖;嗜水气单胞菌;cDNA文库;免疫基因
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基因组学与应用生物学
• 第 33 卷
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