刘晓林 , 杨学勇 , 余宏军 , 蒋卫杰 , 赵文超 , 王燕 , 张晓孟

中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京, 100081
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2016 年, 第 35卷, 第 107 篇   
收稿日期: 2015年01月01日    接受日期: 2015年12月31日

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通过对上样量、分离胶浓度、等电聚焦参数3方面条件的优化，采用三氯乙酸/丙酮法提取总蛋白，我们建立了适合于黄瓜叶片总蛋白的双向电泳体系。进一步发现此优化条件同样适用于采用酚提取法提取黄瓜根系和果实总蛋白的双向电泳。具体优化条件为：选用24cm pH4-7线性固相化pH梯度(immobilized pH gradient, IPG)胶条，水化上样，上样量为800μg，分离胶浓度为12.5%，按聚焦程序Ⅱ聚焦后进行双向电泳分离和胶体考马斯亮蓝方法染色。采用该优化的体系可以同时进行黄瓜叶片、根系和果实总蛋白的双向电泳，并获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。

黄瓜；叶片；根系；果实；双向电泳体系