郝朝亮^1,2 , 朱向星^1,2 , 曾永联^1,3 , 全守能^1,2 , 卢晟盛^1,2

1 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530004; 2 广西大学动物科学与技术学院, 南宁, 530004; 3 广西大学生命科学与技术学院, 南宁, 530004
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基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 26 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日

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脂质体法是一种传统的向哺乳动物细胞导入外源基因的方法，然而其转染效率受多种因素影响。本研究将从脂质体和质粒DNA 量、转染暴露时间以及混合孵育时间等四方面进行探索，以寻找最佳的转染体系。试验结果表明最佳转染体系为：脂质体1.25 滋L、DNA 0.7 滋g、脂质体-DNA 混合孵育0 min 以及转染暴露6 h。随后我们用优化过的转染体系对新生广西巴马小型猪肾脏成纤维细胞进行转绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein, GFP)操作，获得了(26.45依2.11)%的转染率，并以此为核供体经体细胞核移植技术成功构建表达GFP 的广西巴马小型猪克隆胚胎，同时证实转基因克隆胚的体外发育能力比得上非转基因克隆胚。这为我们构建用于人类疾病研究的基因修饰广西巴马小型猪奠定了基础。

脂质体转染法； 转基因；克隆； 广西巴马小型猪