陈小玲 , 陈东 , 张穗生 , 陈英

广西科学院非粮生物质酶解国家重点实验室, 国家非粮生物质能源工程技术研究中心, 广西生物质炼制重点实验室, 南宁, 530007
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 67 篇   
收稿日期: 2014年01月06日    接受日期: 2014年02月10日

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为了提高瑞氏木霉(Trichoderma reesei)纤维素酶的活力，用类似基因改组的方法改造其碳源阻遏相关基因cre1。以瑞氏木霉基因组DNA 为模板PCR 扩增cre1 基因，用DNase玉消化cre1 基因后，回收50~100 bp 的DNA 片段，用T4 DNA 连接酶连接，以连接产物作为模板进行无引物PCR，并将PCR 产物转入瑞氏木霉原生质体，通过测定滤纸酶活的方法筛选突变菌株，并在NCBI 上比对分析突变菌株的cre1 基因。结果表明，筛选获得1 株纤维素滤纸酶活比出发菌株提高0.7 倍的突变菌株cre2-3。cre2-3 菌株在液体培养基中呈棉花状，而出发菌株呈小颗粒状，菌株cre2-3 发酵液的颜色比出发菌株的更黄亮。推测cre1 基因与瑞氏木霉菌株的生长代谢有关。

碳源阻遏； DNA 改组； cre1 基因； 瑞氏木霉