冯玉亮 , 黄明月 , 王菲 , 曹启龙 , 冯家勋 , 段承杰

广西大学生命科学与技术学院,亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁,530005
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 108 篇   
收稿日期: 2014年05月07日    接受日期: 2014年06月11日

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碳水化合物结合组件（carbohydrate-binding module, CBM）是某些碳水化合物活性酶（Carbohydrate -active enzymes）上的非催化部分，主要负责与底物特异性结合以提高与之相邻的催化结构域对不可溶底物的催化效率。CBM中的保守芳香族氨基酸通常是这些蛋白的底物结合位点，利用氨基酸定点突变技术可用来寻找和验证CBM中的结合位点的关键氨基酸。本研究的前期工作发现CBM₄₆₂₀₀与其同家族的其它成员相比对底物结合的能力要弱很多，多重序列比对发现家族中某些保守的芳香族氨基酸在CBM₄₆₂₀₀被非芳香族氨基酸替代，这可能是CBM₄₆₂₀₀与底物结合能力弱的原因，因此利用氨基酸定点突变将这些非芳香族氨基酸突变为苯丙氨酸以验证假设。结果表明，CBM₄₆₂₀₀的定点突变并没有增强突变蛋白对底物的结合能力，有些甚至还降低了，这说明可能是其它的因素影响了CBM₄₆₂₀₀对底物的结合能力，本文对这些可能的因素也做了推测。

碳水化合物结合组件；定点突变；芳香族氨基酸；结合能力