重组大肠杆菌表达降氰酶的诱导条件优化  

陈焕基 , 李青云 , 尹业兴 , 刘幽燕 , 甘雨
广西大学化学化工学院,南宁,530004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 116 篇   
收稿日期: 2014年04月10日    接受日期: 2014年05月07日
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摘 要

采用积分光密度法对降氰酶(cyanide-degrading enzyme)基因工程菌BL21(DE3)-pET28a-cdE的诱导表达条件进行优化,以提高目的蛋白的产量和活性。结果显示,重组菌表达降氰酶的最佳诱导条件为温度28℃,初始菌体浓度OD600值为0.6,IPTG浓度为0.8mmol/L,诱导时间12h。研究发现,使用终浓度为0.8mmol/L的IPTG,诱导表达12h,降氰酶蛋白收率达到143.27mg/L,比活力达到11 560U/mg。与不添加诱导剂相比,重组蛋白的收率和比活力分别提高了64倍和9倍。

关键词
重组大肠杆菌;降氰酶;诱导表达;积分光密度;蛋白收率;比活力
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基因组学与应用生物学
• 第 33 卷
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