王保全¹ , 李霞³ , 平娟¹ , 李峰¹ , 张伟² , 张永州¹ , 庞晓斌⁴

1 河南大学淮河临床学院,开封,475001
2 中国科学院生物物理所,北京,100101
3 河南大学护理学院,开封,475004
4 河南大学药学院,开封,475004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 102 篇   
收稿日期: 2014年05月07日    接受日期: 2014年06月05日

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运用指数富集配基系统技术(SELEX)筛选人超氧化物歧化酶(rhSOD)特异性核酸适体。体外化学合成长度为78bp的中间含有35个随机序列的单链DNA文库，通过比较不对称PCR和生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库的效果，确定以生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库，采用硝酸纤维素膜为介质，以SOD蛋白为靶标，筛选其亲和性核酸适体，酶联仪测定D450值，计算每轮ssDNA文库与靶分子的结合率。经过11轮筛选后，随机ssDNA文库与SOD的结合率从初始的0.47%上升到37.5%， 随着筛选轮数的增加，ssDNA与靶分子结合率趋于稳定。初步筛选出具有高亲和力的 SOD 酶特异性核酸适体，为进一步开发和研究 SOD 新药及模拟药物提供参考。

SELEX 技术；超氧化物歧化酶；适体；核酸；筛选