杨加伟 , 程小玲 , 葛正龙

遵义医学院生物化学教研室, 遵义, 563003
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 95 篇   
收稿日期: 2014年05月07日    接受日期: 2014年06月05日

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利用植物生物反应器表达具有应用价值的药用蛋白是近年来生物技术研究热点。本研究利用PCR技术从马铃薯基因组中克隆其叶片组织特异性启动子Prbcs后，利用PLACE等数据库对序列进行启动子元件分析，接着通过重叠PCR、限制性内切酶酶切、体外连接、转化等技术，以双元载体pCambia-2301为骨架，构建Prbcs驱动的药用蛋白人白细胞介素12（hIL12）表达载体。结果显示，本研究成功从马铃薯基因组中扩增得到了623 bp大小的启动子片段，序列分析表明该片段含有典型的启动子元件如TATA-box，以及一些组织特异性的相关响应元件，符合组织特异性启动子的特征；成功获得了基于pCambia-2301的Prbcs驱动的hIL12植物表达载体。本研究获得的Ppatatin启动子及其驱动的hIL12表达载体，为提高hIL12在植物生物反应器中表达量以及优化马铃薯生物反应器打下了基础。

Prbcs启动子；人白细胞介素-12；表达载体；植物生物反应器