孙明哲¹ , 崔娜¹ , 孙晓丽² , 肖佳雷¹ , 吕德康¹ , 朱延明¹

1 东北农业大学, 农业生物功能基因重点实验室, 哈尔滨, 150030；2 黑龙江八一农垦大学农学院, 大庆, 163319
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基因组学与应用生物学, 2014 年, 第 33卷, 第 163 篇   
收稿日期: 2014年12月01日    接受日期: 2014年12月04日

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MicroRNA (miRNA)在植物对各种逆境胁迫的反应中发挥重要的作用。本研究室在前期研究中，通过基因芯片技术构建了水稻冷胁迫miRNA基因表达谱，并筛选获得了冷胁迫诱导表达的miRNA基因2个-Os-miR1435和Os-miR535。本研究针对Os-miR1435基因，首先采用USER^TM技术构建植物超量表达载体，采用农杆菌介导法侵染水稻愈伤组织，获得转基因水稻株系。通过对比野生型和转基因水稻植株的生长发育及农艺性状，发现Os-miR1435基因的超量表达降低了转基因水稻的结实率。通过对比野生型和转基因水稻在种子萌发期和幼苗期冷胁迫处理表型，表明Os-miR1435基因没有影响冷胁迫处理下水稻种子的萌发和幼苗生长。进一步采用psRNA Target软件预测了Os-miR1435的靶基因，通过Real-time PCR分析了靶基因在野生型和转基因植株中的表达量差异，并对靶基因进行了进化分析。本研究将为进一步深入研究Os-miR1435的生物学功能奠定重要的基础。

miRNA；水稻；冷胁迫；转基因；靶基因预测