岑卫健^1,2 , 成春燕³ , 杨丽超³ , 王凛^3,4 , 姜伯乐^1,3

1亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530004; 2广西大学生命科学与技术学院, 南宁, 530004; 3桂林医学院, 桂林, 541004
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基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 64 篇   
收稿日期: 2015年01月01日    接受日期: 2015年01月30日

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本文旨在建立一套适合于十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv. campestris 8004，Xcc 8004)分泌蛋白质的双向电泳技术(Two-dimensional electrophoresis, 2-DE)，以便更好的利用蛋白质组学技术鉴定Xcc 8004的分泌蛋白质。本研究就MME和XCM2两种培养基对分泌蛋白质的诱导能力、蛋白质提取方法以及样品上样量等方面对2-DE的影响进行了比较，结果表明，XCM2培养基对Xcc 8004分泌蛋白质的诱导能力比MME强。用TCA/丙酮法沉淀蛋白质得到的双向电泳图谱背景清晰，分辨率高。分别采用400 μg、300 μg、250 μg和150 μg四个不同的上样量进行双向电泳，结果显示在上样量为250 μg-300 μg时(IPG pH 3-10, 24 cm)，电泳图谱分辨率最好。综上可知，XCM2培养基比较适合用于Xcc 8004分泌蛋白质的诱导，TCA/丙酮法提取分泌蛋白质为较优方法，250 μg-300 μg是较为合适的上样量。

十字花科黑腐病菌；双向电泳；分泌蛋白质；蛋白提取方法