转录抑制因子GCF2促进肝癌细胞BEL-7404迁移相关靶基因的初步鉴定  

吴博1 , 晁耐霞2 , 赵飞兰3 , 李金平4 , 陈力1 , 陈德凤1 , 黄天明1 , 莫发荣1 , 张琪惠1 , 罗国容1
吴博1 晁耐霞2赵飞兰3李金平4陈力1 陈德凤1 黄天明1 莫发荣1 张琪惠1 罗国容1* 1广西医科大学组织胚胎学教研室, 南宁, 530021; 2广西医科大学生物化学与分子生物学教研室, 南宁, 530021; 3广西中医药大学组织胚胎学教研室, 南宁, 530021; 4广西桂林医学院组织胚胎学教研室, 桂林, 541004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 5 篇   
收稿日期: 2014年12月03日    接受日期: 2015年01月01日
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摘 要

GCF2是转录抑制因子,为了研究GCF2蛋白在肝癌细胞BEL-7404迁移中的作用,并根据芯片结果验证GCF2调控参与迁移的靶基因,我们采用siRNA沉默GCF2蛋白表达,然后通过transwell实验检测GCF2沉默前后BEL-7404细胞迁移的变化,最后荧光定量RT-PCR和western blot验证芯片结果中与迁移相关基因的表达。研究结果显示siRNA干扰GCF2成功后进行迁移实验,siRNA-GCF2组,FAM-siRNA-NC组,脂质体组,和未处理野生型BEL-7404组24h后细胞穿过8 μm 微孔滤膜的数目( ±s)分别为41.66±1.52,41.66 ±1.15, 41.33±1.5,18.66 ±0.577,差异均有统计学意义(P<0.01)。QRT-PCR验证9个候选基因中,MyD88在siRNA-GCF2组内表达显著高于其余三组(P < 0.05)。Western blot检测siRNA干扰GCF2后肝癌细胞BEL-7404的MyD88的蛋白表达显著高于其余三组(P < 0.05)。结果表明siRNA沉默转录因子GCF2蛋白表达可抑制肿瘤细胞BEL-7404迁移,推测GCF2作为转录因子可能通过抑制靶基因MyD88的表达参与细胞的迁移。

关键词
原发性肝细胞肝癌;GCF2;细胞迁移;小干扰RNA;MyD88
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基因组学与应用生物学
• 第 34 卷
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