1苏州出入境检验检疫局, 苏州, 215000; 2苏州大学金螳螂建筑与城市环境学院, 苏州, 215123
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 63 篇
收稿日期: 2015年01月01日 接受日期: 2015年01月30日
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 63 篇
收稿日期: 2015年01月01日 接受日期: 2015年01月30日
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摘 要
为从昆虫干标本中获取高质量DNA,以利于后期PCR扩增目的基因,本研究对DNA提取前昆虫干标本的预处理方法进行探讨,并分别测定其纯度和质量,用不同引物进行了扩增效果对比。结果显示:经过预处理的样品DNA平均含量均高于CK的52.283 ng/μL,最高为0.9%NACL处理3h,平均含量达122.632 ng/μL;米象4种预处理方法提取的DNA利用引物Lco1490/ Hco2198及UEA7/ UEA10均能扩增出650bp长度条带,仅有0.9% NACL溶液浸泡3h处理的米象可通过引物J173/J1331扩增出1000bp的长片段条带。研究表明,经过预处理后,一定程度上减少了基因组DNA的断链,主要对样品DNA的质量浓度影响显著;以9%NACL溶液 3h预处理后的昆虫干标本,利用磁珠法所提DNA的质量及PCR扩增效果最佳。
关键词
昆虫干标本;预处理;磁珠法;DNA提取;PCR扩增
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