马尔尼菲青霉菌基于pkuB缺失的高效基因打靶系统构建  

卢姗1 , 蓝秀万1,2,3,4 , 陶玉婷1 , 王超1 , 梁晓乐2,3 , 梁莹5 , 黄勇奇1,4 , 贺菽嘉1,4 , 何志义3,6
1广西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室, 南宁, 530021; 2广西医科大学基础医学中心实验室, 南宁, 5300212; 3广西医科大学基础医学研究重点实验室, 南宁, 530021; 4广西医科大学基础医学院微生物学教研室, 南宁, 530021; 5广西医科大学第一附属医院呼吸科, 南宁, 530021
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 118 篇   
收稿日期: 2015年02月02日    接受日期: 2015年02月27日
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摘 要

马尔尼菲青霉是温度依赖双相性条件性致病真菌,可感染免疫缺陷人群,区域流行于东南亚和我国南方。马尔尼菲青霉已成为研究真菌双相性态转换和病原-宿主相互作用分子机制的模式系统。功能基因组学研究为深入探讨马尔尼菲青霉双相转换和致病分子机制提供了线索,大量的候选基因功能需要高通量的基因修饰方法验证。在许多真菌中已建立基于阻断DNA非同源重组修复途径提高基因打靶效率的实验研究模型。 本文报道在马尔尼菲青霉中通过缺失马尔尼菲青霉非同源重组修复途径的关键组分PKUB同源基因pkuB构建了一个高效基因打靶系统。结果表明,以pkuB基因缺失菌株(ΔpkuB)为出发菌株能降低外源DNA片段的非同源末端连接重组的概率而显著提高基因打靶效率,  pkuB基因缺失不影响菌落形态和双相转换能力。高效基因打靶分子遗传实验模型的建立为大规模进行马尔尼菲青霉基因功能研究提供了有力的工具。

关键词
马尔尼菲青霉;pkuB;基因打靶;同源重组;非同源重组末端链接
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基因组学与应用生物学
• 第 34 卷
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