(G1510434张笠)聚乙烯醇和卵泡液添加方式对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响-初审0330 修改文章2  

张笠1 , 沈开元1,2 , 黄玥萌1 , 司景磊1 , 程晓芳1 , 蒋钦杨1 , 刘庆友1,2 , 郭亚芬1 , 兰干球1 , 蒋和生1
1广西大学动物科学技术学院, 南宁, 530004; 2亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530004
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 187 篇   
收稿日期: 2015年04月01日    接受日期: 2015年04月30日
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摘 要

本试验研究目的在于探讨在猪卵母细胞体外成熟(IVM)过程中聚乙烯醇(polyvinyl alcohol, PVA)和猪卵泡液(porcine follicular fluid, PFF)添加方式对猪卵母细胞体外成良TCM-199+10% FBS+0.1% PVA (PMH-PVA)成熟液中培养22~23 h;再移至无HCGPMSGPM-PFFPM-PVA的成熟液中成熟培养至44 h。试验:(1)处理组1-使用PMH-PFF培养22~23 h后,更换PM-PFF继续培养至44 h(2)处理组2-使用PMH-PFF培养22~23 h后,更换PM-PVA继续培养至44 h(3)处理组3-使用PMH-PVA培养22~23 h后,更换PM-PVA继续培养至44 h(4)处理组4-使用PMH-PVA培养22~23 h后,更换PM-PFF继续培养至44 h。将在不同成熟体系中IVM 44 h后的卵母细胞进行固定染色,鉴定卵母细胞核和细胞质成熟情况熟及孤雌激活早期胚胎发育的影响。卵母细胞、卵丘细胞复合体(COCs)在含有HCGPMSG的改良TCM-199+10% FBS+10%猪卵泡液(PMH-PFF)或改;对在不同处理组的成熟液中成熟培养44 h的卵母细胞进行孤雌激活后放入PZM-3中培养,分别于第2天、第7天统计分裂率和囊胚发育率。结果表明:经44 h成熟培养后,处理组1卵母细胞核成熟率(42.00%)显著低于处理组2 (64.67%)、处理组3 (69.00%)、处理组4 (64.33%)核成熟率(p<0.05)。处理1、处理2、处理4的卵母细胞皮质颗粒分布类型III比例(62.00%/54.67%/46.67%)均高于处理组3 (28.67%),且处理组1、处理组2卵母细胞皮质颗粒分布类型III 比例显著高于处理组3卵母细胞皮质颗粒分布类型III比例(p<0.05)处理组1、处理组2、处理组4孤雌分裂率(81.92%/76.00%/73.33%)均高于处理组3 (69.00%)。处理组3孤雌激活囊胚率(9.67%)显著低于处理组1 (23.33%)、处理组2 (25.00%)、处理组4 (23.00%)-(p<0.05)。结果表明,在本研究条件下,处理组2的各项指标均优于其它组,IVM液中添加猪卵泡液培养22~23 h后更换添加有PVAIVM液继续培养至44 h,更有利于促进IVM猪卵母细胞核成熟、胞质成熟以及早期孤雌胚胎发育。

关键词
猪;卵母细胞;体外成熟;PVA和猪卵泡液添加方式;孤雌胚胎发育
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基因组学与应用生物学
• 第 34 卷
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