覃玥^1,2 , 杨梦歌² , 朱青² , 王业富²

1河池学院化学与生物工程学院, 宜州, 546300; 2武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室, 武汉, 430072
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基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 157 篇   
收稿日期: 2015年03月02日    接受日期: 2015年03月31日

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 家蚕核型多角体病在广西多批次的养蚕生产中非常普遍，严重影响蚕农的经济效益。根据家蚕核型多角体病毒广西分离株的多角体蛋白基因（polh）序列设计4条特异性 LAMP引物，以感染BmNPV的5龄家蚕血淋巴的多角体DNA为模板，建立了BmNPVLAMP可视化快速检测方法，通过优化LAMP反应体系确定Mg2+、dNTPs、甜菜碱最适终浓度分别为8mmol/L、1.4mmol/L、0.8mol/L，外引物和内引物浓度为0.2μmol/L和1.6μmol/L，在64℃恒温条件下反应1 h；在反应管中加钙黄绿素，通过肉眼观察颜色变化直接判定结果实现可视化检测，该检测方法敏感度高于常规PCR l00倍，模板DNA能检测范围可达25fg/μL，LAMP检测BmNPV具有简便、快速、灵敏等优点，可用于家蚕核型多角体病的早期诊断及流行病学调查。

家蚕核型多角体病毒；可视化快速检测；环介导核酸等温扩增；早期诊断