齐佩瑾 , 吴更

微生物代谢国家重点实验室, 上海交通大学生命科学技术学院, 上海, 200240
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 141 篇   
收稿日期: 2015年03月02日    接受日期: 2015年03月30日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

γ-分泌酶是具有天冬氨酸内切酶活性跨膜蛋白复合物，与阿尔茨海默症的病理特征的β-淀粉样蛋白(amyloid protein β, Aβ)生成有关。nicastrin(NCT)是I 型单次跨膜糖蛋白，具有709个氨基酸。它是γ-分泌酶的重要组分，具有募集和结合γ-分泌酶底物的功能，参与γ-分泌酶的组装过程。本研究中，利用昆虫杆状病毒表达系统表达人源NCT全长和胞外结构域，得到了纯度较好的蛋白，用于晶体初筛。由于nicastrin自身高度糖基化，使用Endo H和PNGase F去糖基化酶进行体外脱糖基作用，使得蛋白均一度提高，纯化到较稳定的胞外结构域蛋白，为下一步对人源nicastrin蛋白进行结构生物学研究奠定了基础。

γ-分泌酶；nicastrin；蛋白表达纯化；去糖基化