1浙江工商大学食品与生物工程学院, 杭州, 310018; 2中国科学院水生生物研究所, 武汉, 430072
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 150 篇
收稿日期: 2015年03月02日 接受日期: 2015年03月31日
作者 通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 150 篇
收稿日期: 2015年03月02日 接受日期: 2015年03月31日
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摘 要
本文研究采用了LC-MS/MS策略探讨建立水牛卵母细胞蛋白质表达谱的方法,为以后研究水牛不同时期的卵母细胞和早期胚胎卵裂分化过程中蛋白质组变化建立研究平台。本实验收集水牛GV期和MⅡ期卵母细胞各500枚,去除透明带后将两个时期的细胞混合后提取蛋白质,蛋白质酶解后通过强阳离子交换色谱预分离多肽混合物,预分离后的馏分采用EASY-nLC结合LTQ-Orbitrap质谱鉴定蛋白质表达谱。通过SEQUEST检索,共鉴定出574种蛋白质,生物信息学分析表明,有明确分子功能相关的蛋白质有487种,与组成细胞成分相关的蛋白质有476种,与生物学进程相关的蛋白质有490种,初步建立了一套获得水牛卵母细胞蛋白质表达谱的方法。结果表明建立的LC-MS/MS策略方法适合于水牛卵母细胞蛋白质组学的研究,卵母细胞蛋白质表达谱数据为今后研究水牛不同时期的卵母细胞和早期胚胎卵裂分化过程中蛋白质组学奠定了方法与理论基础。
关键词
水牛卵母细胞;蛋白质表达谱;LC-MS/MS;LTQ-Orbitrap
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