携带绿色荧光报告基因的EBV-LMP1真核表达载体构建与鼻咽癌细胞中的表达  

撖子建1 , 何芹2 , 鄢雪敏2 , 闫琳琳1 , 蔡琰2 , 黄元姣1,2
1广西医科大学医学科学实验中心, 南宁, 530021; 2广西医科大学 生物化学与分子生物学教研室, 南宁, 530021
作者    通讯作者
基因组学与应用生物学, 2015 年, 第 34卷, 第 176 篇   
收稿日期: 2015年04月01日    接受日期: 2015年04月30日
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摘 要

 潜伏膜蛋白1(LMP1)是由EB病毒编码的致瘤蛋白,众多研究表明LMP1蛋白可通过NF-κB、p38 MAPK、c- JNK等多条重要信号通路引起鼻咽癌细胞的生物学行为改变。我们从EB病毒阳性的B95-8狨猴淋巴瘤细胞中克隆 EB 病毒LMP1 cDNA , 构建携带绿色荧光基因的真核表达 质粒pIRES2-Zs-Green1-LMP1 ,通过脂质体转染的方法将质粒导入鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2中,利用质粒所携带的绿色荧光蛋白表达粗略计算转染的效率,通过免疫细胞化学(ICC)、RT-PCR、Western-Blot检测该质粒的表达 。本实验室所构建的 pIRES2 –Zs-Green1- LMP1表达质粒能在鼻咽癌细胞内表达 LMP1蛋白,为后续的实验研究奠定基础。

关键词
EBV潜伏膜蛋白1 (EBV-LMP1);cDNA克隆;绿色荧光蛋白真核表达载体;质粒pIRES2-Zs-Green1
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基因组学与应用生物学
• 第 34 卷
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